Eletroforese Capilar, Slides de Instrumentação e Análise Química

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Eletroforese Capilar

Introdução

A eletroforese é um método de separação baseado nas velocidades de migração diferenciais de espécies carregadas em um campo elétrico cc.

Aplicações

Por muitos anos, a eletroforese tem sido o método mais empregado para a separação de proteínas (enzimas, hormônios, anticorpos) e ácidos nucléicos (DNA, RNA), para os quais oferece uma resolução que não encontra paralelo.

Uma característica que difere a EC das outras técnicas é a sua capacidade única para separar macromoléculas carregadas eletricamente de interesse tanto em indústrias de biotecnologia quanto em pesquisas biológicas.

Aplicações

Projeto Genoma

Na década de 70 que os primeiros métodos para sequenciamento de DNA foram criados, dando início à era de sequenciamento de primeira geração. Essa mudança, responsável por um grande impacto na ciência, aconteceu com a utilização da técnica de separação de polinucleotídeos por comprimento através da eletroforese em gel

Aplicações

Eletroferograma mostrando a separação de alcalinos,alcalinoterrosos e lantanídeos 7

Aplicações

Separação de drogas antiinflamatórias por ECZ^8

Instrumentação

Esquema de um equipamento de eletroforese capilar

Instrumentação

Sistema de eletroforese capilar de zona

Injeção da amostra

Injeção da amostra

● A introdução da amostra é realizada em uma das extremidades e a detecção na outra. ● Um potencial de 5 a 30 kV cc é aplicado entre os eletrodos.

Capilares

Detectores

Instrumentação

⦿ Reservatório dos Tampões:

• Cátodo
• Ânodo

⦿ Controle de Temperatura:

• Líquido
• Ar Forçado

⦿ Fonte de Alta Tensão:

• 30 kV - 300 μA - 6W
• Bi-polaridade

⦿ Manipulação de Dados:

• Análise Qualitativas
• Análise Quantitativas
• Impressão de Relatórios
• Eletroferograma

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Instrumentação

Aplicação de Altas Voltagens: ● Aumenta gradiente de T dentro do capilar ● Muda a viscosidade da solução ● Aumenta o fluxo ● Degenera a separação ● Separações não reprodutíveis ● Decomposição ou desnaturação da amostra ● Fervura do solvente e formação de bolhas causando descontinuidade elétrica