Eletroforese
MÉTODOS E INSTRUMENTOS DE ANÁLISE
CIÊNCIAS BIOMÉDICAS LABORATORIAIS
1º ANO -2º SEMESTRE
Docente: Ana Carina Santos
Discentes: Beatriz Guisado nº 20191308
Marta Diogo nº 20201534
Rafael Pinto nº 20201531
Tiago Plácido nº 20201841
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Eletroforese e tipos de Eletroforese mais usados, Trabalhos de Bioquímica e Instrumentação
Trabalho sobre eletroforese, fala sobre o que é, o que faz e os tipos.
Tipologia: Trabalhos
2020
1 / 17
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Eletroforese
M É T O D O S E I N S T R U M E N T O S D E A N Á L I S E
C I Ê N C I A S B I O M É D I C A S L A B O R A T O R I A I S 1 º A N O - 2 º S E M E S T R E
Docente: Ana Carina Santos Discentes: Beatriz Guisado nº 20191308 Marta Diogo nº 20201534 Rafael Pinto nº 20201531 Tiago Plácido nº 20201841
Introdução
Métodos e Instrumentos de Análise
Esta técnica foi
descoberta em 1937
pelo bioquímico
Arne Tiselius
Eletroforese
de fase
líquida
Em 1949, Linus
Pauling faz uma
descoberta
importante
Fracionamento
isoelétrico da
Hemoglobina S
Tipos de Tinas de Eletroforese
Métodos e Instrumentos de Análise
Figura 2 – Tina de
eletroforese horizontal
Figura 3 – Tina de
eletroforese vertical
Aplicação Geral da Eletroforese
1. O fracionamento de proteínas, enzimas e hemoglobinas para o estabelecimento
de concentrações alteradas e/ou posicionamentos anormais de frações que
permitem descobrir patologias;
2. O fracionamento de segmentos de DNA, RNA previamente submetidos a
métodos de biologia molecular que irão permitir a resolução de casos de
paternidade, descobertas a nível forense e genótipos e haplótipos de interesse
clínico e antropológico.
Métodos e Instrumentos de Análise
Gel de Agarose
Métodos e Instrumentos de Análise
- É utilizado para o fracionamento eletroforético sobretudo de
DNA/RNA;
- Possui uma ampla capacidade de separação, boa resolução e
é usado na clínica e a na investigação.
Figura 4 – Representação do movimento dos
fragmentos de DNA
PCR
- É a reação em cadeia da polimerase e é uma técnica de rotina
que permite fazer uma multiplicação, ou seja, permite a obtenção de muitas cópias de uma região especifica do DNA, in vitro;
- As etapas básicas da PCR são a desnaturação, a ligação e a
extensão/síntese;
- Na técnica existe a adição de um corante de ácidos nucleicos:
o brometo de etídio. (^) Figura 5 – Bandas de DNA fluorescentes
após coloração com Brometo de Etídio
Métodos e Instrumentos de Análise
Acetato de Celulose
Vantagens:
- Material neutro;
- Absorção uniforme das proteínas;
- Micróporos homogéneos;
- Boas condições de armazenamento por longos períodos de tempo;
- Baixo custo o que torna este meio ideal para uso na rotina laboratorial;
- Permite o fracionamento de proteínas, lipoproteínas, hemoglobinas e substâncias com baixo peso molecular como aminoácidos, peptídeos e nucleótidos;
- Rápida separação proteica.
Métodos e Instrumentos de Análise
Figura 8– Tiras de acetato de celulose coradas
Acetato de Celulose
Desvantagens:
- O fracionamento proteico é limitado, por separar apenas cinco a sete grupos de proteínas;
- Com o desenvolvimento de novas técnicas que permitem principalmente uma separação proteica de alta resolução,
esta técnica caiu em desuso.
Métodos e Instrumentos de Análise
- Um exemplo prático do uso da focalização isoelétrica é o teste do pezinho, que é feito em recém-nascidos com o objetivo de fazer o rastreamento de hemoglobinopatias.
Métodos e Instrumentos de Análise
Figura 10 – Representação do teste do pezinho e eletroforese da
hemoglobina
Conclusão
Referências Bibliográficas
- CORRÊA, E.; POSSIK, P. A análise de DNA por eletroforese [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em
https://www.ciencianews.com.br/arquivos/ACET/IMAGENS/biologia_molecular/testesgeneticos.pdf
- Teste do pezinho, Hospital da Luz (2019) [Consult. 9 de maio de 2021]. Disponível em
https://www.hospitaldaluz.pt/pt/guia-de-saude/dicionario-de-saude/T/186/teste-pezinho-diagnostico- precoce
- Focalização isoelétrica, Wikipédia, a enciclopédia livre (2018) [Consult. 9 de maio de 2021]. Disponível
em https://pt.wikipedia.org/wiki/Focaliza%C3%A7%C3%A3o_isoel%C3%A9trica#T%C3%A9cnica
- Manual do paciente, Tenho Traço Falcêmico… e agora? (2004) [Consult. 10 de maio de 2021]. Disponível
em http://www.hemorio.rj.gov.br/Html/pdf/manuais_2010/Tenho_traco_falcemico_agora.pdf
Referências Bibliográficas
- Eletroforese em Gel de Poliacrilamida, Portal educação [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/biologia/eletroforese-em-gel-de-poliacrilamida/
- What is Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE)?, News Medical Life sciences (2019) [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Polyacrylamide-Gel-Electrophoresis-(PAGE).aspx
- Polyacrylamide Gel Electrophoresis, Cleaver Scientific [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em https://www.cleaverscientific.com/applications/polyacrylamide-gel-electrophoresis/
- Reação em cadeia da polimerase (PCR). [Consult. 10 de maio de 2021]. Disponível em https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr