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eletroforese; biologia celular
Tipologia: Notas de estudo
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Técnica de separação de partículas através de
Técnica de separação de partículas através de
corrente elétrica
corrente elétrica
1-Identificação de substâncias
1-Identificação de substâncias
2-Homogeneidade de sistemas biológicos
2-Homogeneidade de sistemas biológicos
3-Determinação de pontos isoelétricos
3-Determinação de pontos isoelétricos
papel de filtro, sílica gel, membranas de acetato
papel de filtro, sílica gel, membranas de acetato
de celulose, gel de agarose, amido ou
de celulose, gel de agarose, amido ou
poliacrilamida, entre outros.
poliacrilamida, entre outros.
A eletroforese que utiliza suporte é também
A eletroforese que utiliza suporte é também
conhecida como eletroforese de zona:
conhecida como eletroforese de zona:
Iniciada por König em 1937 na separação de
Iniciada por König em 1937 na separação de
veneno de cobra recorrendo a papel de filtro
veneno de cobra recorrendo a papel de filtro
como meio-suporte, em 1946, Martin retomou
como meio-suporte, em 1946, Martin retomou
esta eletroforese.
esta eletroforese.
.
Os suportes em gel apresentam grande
Os suportes em gel apresentam grande
capacidade de separar as moléculas com base no
capacidade de separar as moléculas com base no
tamanho molar
tamanho molar
Eletroforese em suporte de papel é muito
Eletroforese em suporte de papel é muito
eficiente no que diz respeito a separação de
eficiente no que diz respeito a separação de
partículas com grande diferenças de cargas
partículas com grande diferenças de cargas
Substâncias anfóteras indispensável manter
Substâncias anfóteras indispensável manter
constante o pH do meio durante a eletroforese, pelo
constante o pH do meio durante a eletroforese, pelo
uso de soluções-tampão
uso de soluções-tampão
Os principais tipos de eletroforese são:
1- Eletroforese capilar
2- Eletroforese em gel
1-Gel gelitificado de agarose
1-Gel gelitificado de agarose
2-Separa fragmentos longos de DNA
2-Separa fragmentos longos de DNA
3-Corrente elétrica sobre gel
3-Corrente elétrica sobre gel
4-Partículas menores tem maior velocidade de
4-Partículas menores tem maior velocidade de
chegar ate o pólo positivo
chegar ate o pólo positivo
1-Fragmentos pequenos de DNA ou outra
1-Fragmentos pequenos de DNA ou outra
molecula
molecula
2-Recupera e purifica amostras
2-Recupera e purifica amostras
3-Em cubas de vidros
3-Em cubas de vidros
4-Aplicacao de corrente
4-Aplicacao de corrente
1- A ELETROFORESE CAILAR DE ZONA OU SOLUÇÂO
LIVRE é o modo mais utilizado devido à simplicidade do
equipamento e maior facilidade na otimização das
condições experimentais.
2- o capilar e os reservatórios contendo os
eletrodos são cheios com um tampão (denominado
eletrólito carreador), o qual
conduz a corrente elétrica e fornece a capacidade
tamponante.
3-se introduz uma amostra contendo uma mistura iônica
no capilar como uma banda de pequena espessura
4-Quando o campo elétrico é aplicado, forças
elétricas atuam nas cargas da camada difusa.
5-os íons arrastam moléculas de água, formando
um fluxo que é direcionado para o catodo,
enquanto a parede do capilar permanecer
negativa.
